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熱電色譜柱樣品制備與操作
更新時(shí)間:2019-03-22   點(diǎn)擊次數:1772次
  熱電色譜柱為芳香和中等極性化合物的分析提供*的選擇性。苯環(huán)通過(guò)C4鏈連接到硅膠基質(zhì)上,可更好地與分析物分子上的芳香基團接觸。熱電色譜柱包含C4連接基團,特別適合苯環(huán)和芳環(huán)分子的相互作用?;诟呒児枘z設計,是設計用于解決現代色譜法諸多困難問(wèn)題的系列產(chǎn)品。熱電色譜柱對芳環(huán)分析物具有出眾的保留能力和*的選擇性。
  熱電色譜柱樣品制備與操作:
  1、樣品應當盡可能溶解在能與流動(dòng)相相互溶的溶劑中。除特殊指明外,如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
  2、樣品溶液在進(jìn)樣前應使用針頭式過(guò)濾器對樣品預先過(guò)濾。頻繁改變流動(dòng)相組成,會(huì )加速降低柱效。
  3、色譜柱由高壓勻漿法裝填,能承受較高壓力。為獲得較佳分離效果,使用時(shí)請不要超過(guò)200kgf,而且避免壓力突然上升或變化,否則會(huì )造成硅膠填料的破壞,減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外較高操作溫度不要超過(guò)60℃。
  熱電色譜柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎就會(huì )降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中,需要注意下列問(wèn)題,以維護色譜柱。
 ?、俦苊鈮毫蜏囟鹊募眲∽兓叭魏螜C械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料,因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉動(dòng)不能過(guò)緩(如前所述)。
 ?、趹饾u改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?br /> ?、垡话阏f(shuō)來(lái)熱電色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì )迅速降低柱效。
 ?、苓x擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
 ?、荼苊鈱⒒|(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
 ?、藿?jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對流路系統中流動(dòng)相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種流動(dòng)相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50~75ml。
 ?、弑4嫔V柱時(shí)應將柱內充滿(mǎn)或,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間。
 ?、酂犭娚V柱使用過(guò)程中,如果壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時(shí)應更換濾片或將其取出進(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)入柱內,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大。
  熱電色譜柱是高度穩定的強陰離子交換的硅膠為基質(zhì)材料的色譜填料,專(zhuān)門(mén)為使用含水和低pH值流動(dòng)相時(shí)設計,適合分析小分子的有機酸。
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