所有色譜峰均展寬的故障小排查,如果實(shí)驗中碰到先洗脫出來(lái)色譜峰展寬時(shí)該如何解決呢?下面將為大家介紹所有色譜峰均展寬的可能原因及解決方法。
一、樣品量過(guò)載
稀釋樣品或減少進(jìn)樣體積使色譜柱恢復平衡。注意:使用強度較弱(相對于流動(dòng)相而言)的樣品溶劑,進(jìn)樣體積可以達到色譜柱死體積的10%左右;而使用強度較強的溶劑,進(jìn)樣體積可能高僅為柱死體積的1%。
二、室溫變化過(guò)大
需要使用色譜柱恒溫箱,以保證色譜柱溫度恒定。
三、系統沒(méi)有達到平衡
請保證色譜柱、檢測器等有足夠的時(shí)間平衡。如果是梯度洗脫,兩次進(jìn)樣間保證足夠的時(shí)間使系統重新達到平衡。色譜柱次使用離子對試劑時(shí),要有充足體積的流動(dòng)相和足夠的沖洗時(shí)間確保色譜柱充分平衡。
四、色譜柱問(wèn)題
若色譜柱問(wèn)題可能會(huì )導致多種譜圖異常情況。色譜柱被污染,如果是因為色譜柱被污染導致了問(wèn)題的出現,則應按照相關(guān)方法沖洗色譜柱,如果這樣做仍不能使問(wèn)題得到解決,則需更換色譜柱;色譜柱柱效下降,如懷疑因色譜柱柱效降低導致,則要用一支柱效好的色譜柱更換當前色譜柱,然后用一系列標準樣品進(jìn)行測試,比較保留時(shí)間的重復性,如果保留時(shí)間是重復的,則表明原來(lái)的色譜柱柱效已經(jīng)下降,需更換色譜柱,如果保留時(shí)間不穩定,則問(wèn)題可能出在流動(dòng)相混合不均勻、溶劑或保護柱、在線(xiàn)過(guò)濾器被污染等;如果系統中使用了保護柱,在測試柱效時(shí)應將其卸下,保護柱也可能是污染源,所以在更換色譜柱的時(shí)候有必要將保護柱一同更換。
五、色譜柱選擇不當
檢查使用的色譜柱內徑和填料是否正確。
六、保護柱問(wèn)題
更換被污染的或者柱效下降的保護柱后再測試色譜柱的柱效,正常情況下柱效應該是上升的。如果不是,應按照前面討論的方法檢查色譜柱是否被污染或柱效是否下降。
迅速診斷提示:所有的色譜峰都展寬通常是由于儀器或色譜柱選擇不當而造成的。一般要先檢查色譜柱和保護柱,因為它們是系統的核心組成部分,需要重點(diǎn)排查。