離心管的離心作用原理
更新時(shí)間:2020-11-19 點(diǎn)擊次數:2018次
離心管是實(shí)驗室里面常見(jiàn)的一種實(shí)驗耗材,主要是配合離心機用的。即將實(shí)驗液體裝在其中,然后放在離心機里面離心。 它是一種利用離心技術(shù),用于生物樣品的分離和制備的管狀試樣容器。通過(guò)離心機高速旋轉提供的巨大離心力,使液體中的微小顆粒沉降,從而和溶液分離。其由高質(zhì)量的透明高分子材料聚丙烯制成,廣泛應用于多種試驗操作,滿(mǎn)足生物分析級要求。
離心管的離心作用原理:
當一個(gè)粒子(生物大分子或細胞器)在高速旋轉下受到離心力作用時(shí),此離心力“F”由下式定義,即:F=ma =mω2 ra—粒子旋轉的加速度,m—沉降粒子的有效質(zhì)量,ω—粒子旋轉的角速度,r—粒子的旋轉半徑(cm)。通常離心力常用地球引力的倍數來(lái)表示,因而稱(chēng)為相對離心力“RCF”?;蛘哂脭底殖?ldquo;g”來(lái)表示,例如25000×g,則表示相對離心力為25000。
離心管應用:
*生物樣品濃縮:包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物
*組織培養提取物或細胞裂解液中大分子組分的純化
*對稀釋或從柱洗脫液預先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮
*脫鹽和緩沖液更換
超濾離心管使用方法和注意事項:
1、選擇合適的超濾離心管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾離心管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾離心管。
2、新買(mǎi)來(lái)的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量*過(guò)膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過(guò)管頂的白線(xiàn)為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾離心管需要插在冰上預冷。
3、質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開(kāi)始離心超濾(離心機預冷至4度)。不同離心機的轉速rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調至低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉速之后,方可離開(kāi)離心機,否則離心機出問(wèn)題時(shí),無(wú)法抓緊時(shí)間處理,后果不可預測!