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依利特色譜柱的基本原理及操作指南

更新時(shí)間:2024-10-11點(diǎn)擊次數(shù):156
   依利特色譜柱作為一種高效的分析工具,在生物醫(yī)藥、食品、環(huán)境及生化等領(lǐng)域中發(fā)揮著重要作用。其基本原理基于液相色譜技術(shù),通過固定相和流動(dòng)相的選擇與優(yōu)化,實(shí)現(xiàn)生物樣品中目標(biāo)分子的高效、準(zhǔn)確分離和檢測(cè)。
 
  基本原理
 
  依利特色譜柱的核心在于其液相色譜技術(shù)。該技術(shù)利用液體作為流動(dòng)相,通過柱子內(nèi)的固定相對(duì)樣品中的不同成分進(jìn)行吸附和解吸,從而實(shí)現(xiàn)分離。在色譜柱中,不同的物質(zhì)因其物理化學(xué)性質(zhì)(如極性、分子大小、電荷等)不同,會(huì)在固定相和流動(dòng)相之間發(fā)生不同的相互作用,導(dǎo)致它們?cè)谥又械囊苿?dòng)速度不同,進(jìn)而達(dá)到分離的目的。
 
  操作指南
 
  開機(jī)與準(zhǔn)備
 
  1.開機(jī):首先,按下溶劑輸液泵上的power鍵,等待自檢完畢后開始操作。
 
  2.排氣:逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)排氣閥(不超過180°),打開排氣閥,按purge鍵排氣泡,直至流動(dòng)相連續(xù)流出且無(wú)氣泡。
 
  3.設(shè)定流速:按Pump鍵啟動(dòng)泵,觀察屏幕上壓力顯示,待壓力上升平穩(wěn)后,逐步升高流速至實(shí)驗(yàn)所需。
 
  4.檢測(cè)器與工作站:打開檢測(cè)器,調(diào)節(jié)至實(shí)驗(yàn)所需波長(zhǎng);打開工作站,查看基線,待基線走平后準(zhǔn)備進(jìn)樣。
 
  進(jìn)樣與分析
 
  1.樣品準(zhǔn)備:將待測(cè)樣品溶解在合適的溶劑中,并進(jìn)行必要的預(yù)處理,如過濾、稀釋等。
 
  2.進(jìn)樣:將預(yù)處理后的樣品注入進(jìn)樣器,通過移液器將樣品送入色譜柱。
 
  3.分離與檢測(cè):樣品在色譜柱中經(jīng)過吸附和解吸過程,分離成不同成分。隨后,通過檢測(cè)器(如紫外線檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等)進(jìn)行檢測(cè),將檢測(cè)到的信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào),并通過數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)記錄。
 
  維護(hù)與保養(yǎng)
 
  1.沖洗:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用水或含水甲醇溶液沖洗色譜柱,確保無(wú)殘留物。若流動(dòng)相含有無(wú)機(jī)鹽,需保證足夠的沖洗時(shí)間。
 
  2.清洗:定期清洗單向閥和吸濾頭,使用純凈水和異丙醇進(jìn)行超聲清洗。同時(shí),定期沖洗檢測(cè)池,以去除雜質(zhì)和微生物。
 
  3.保護(hù)柱的使用:加裝保護(hù)柱可有效過濾流動(dòng)相和樣品中的不溶物和化學(xué)污染,延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。保護(hù)柱應(yīng)定期更換,以避免柱壓過高或峰形變壞。
 
  

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